目的 探讨人脑胶质瘤 SHG-44 细胞 O（6）-甲基鸟嘌呤 DNA 甲基转移酶（MGMT）基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。 方法 取处于对数生长期的人脑胶质瘤 SHG-44 和 U251 细胞，分别加入 5-氮-2’脱氧胞苷（5-Aza-CdR）培养 6 d 后收集细胞，同时以未加 5-Aza-CdR 的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组 DNA，采用甲基化特异性 PCR（MSP）检测 MGMT 基因的甲基化状态，并利用蛋白质印迹方法检测 MGMT 蛋白的表达。将收集的细胞分为 3 组，分别加入浓度为 125、100、75、50、25、15、10 μg/ml 的尼莫司汀（ACNU）和 50、25、15、10、5、2.5、1 μg/ml 的替莫唑胺（TMZ）以及等量的完全培养液（阴性对照），采用噻唑蓝（MTT）法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性，以细胞存活 50% 时所对应的药物浓度（IC50 值）作为衡量细胞对药物敏感性的指标，实验重复 3 次。 结果 正常培养的 SHG-44 细胞 MGMT 基因启动子呈甲基化状态，MGMT 蛋白表达缺失，对 ACNU 和 TMZ 的 IC50 值分别为 30、11 μg/ml，表现为对烷化剂药物敏感；用 5-Aza-CdR 处理后，SHG-44 细胞 MGMT 基因启动子成功脱甲基化，MGMT 蛋白恢复表达，其对 ACNU 和 TMZ 的 IC50 值分别升高了 2.5 和 3.1 倍（均 P < 0.05），对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和 5-Aza- CdR 处理的 U251 细胞 MGMT 基因启动子均呈未甲基化状态，都能表达 MGMT 蛋白，并且均表现为对 ACNU 和 TMZ 烷化剂药物耐药。 结论 MGMT 基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导 MGMT 蛋白表达的能力，并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。
