目的 探讨两个与细胞壁重建相关基因在不同浓度草酸影响猪苓菌核形成中与细胞壁重建的关系。
方法 克隆药用真菌猪苓菌核形成相关的细胞壁重建蛋白含激酶结构域蛋白（PuPK）与糖苷水解酶第四家族蛋白（PuCE4）编码基因 cDNA 全长序列，预测其蛋白的理化性质、结构域等特征并进行序列比对分析。利用 qPCR 技术分析这两个基因在不同浓度草酸处理下的猪苓菌丝及菌核中的表达差异。
结果 PuPK 和 PuCE4 基因序列全长分别是 1735 bp 和 1900 bp，ORF 区分别为 1200 bp 和 1395 bp，分别编码 399 和 464 个氨基酸，推测分子量分别为 45.44 kD 和 49.06 kD。系统进化树分析结果显示猪苓 PuCE4 与栓菌属（Trametes sp.）真菌亲缘关系较近；PuPK 与真菌 Dichomitus squalens 进化上最保守。相比于对照组菌丝，PuPK 与 PuCE4 在低浓度草酸组猪苓菌核和菌丝中均显著高表达，而在高浓度草酸组菌丝中低表达；在同一处理组（低浓度草酸组与对照组）中，这两个基因在菌核中的表达显著高于菌丝。
结论 PuPK 与 PuCE4 在猪苓菌核形成过程中与细胞壁重建密切相关，为进一步研究草酸影响猪苓菌核发育及其与细胞壁重建的关系提供科学依据。
目的 研究锌指 CCHC 型蛋白 3（ZCCHC3）抑制 HIV-1 病毒复制的机制。
方法 利用 CRISPR-Cas9 技术分别构建环状GMP AMP 合成酶（cGAS）及维甲酸诱导型基因 I（RIG-I）双敲除的细胞系；利用分子克隆技术构建不同的 ZCCHC3 截短体质粒；在此基础上细胞转染 ZCCHC3 及截短体质粒，用 Western blot 测定对病毒蛋白表达的影响；用荧光素酶报告系统检测 ZCCHC3 对 HIV-1 假病毒的抑制活性；利用 RT-qPCR 检测 HIV-1 不同类型 mRNA 水平；通过 RNA 免疫共沉淀实验检测 ZCCHC3 与 HIV-1 的 RNA 结合区域。
结果 ZCCHC3 能显著降低 HIV-1 基因组中 GAG 蛋白的表达及 HIV-1 假型病毒的复制，且在敲除 cGAS 与 RIG-I 细胞系中仍然能维持相似的抑制活性；ZCCHC3 蛋白的 N 端截短体抑制 HIV-1 效果显著优于 C 端截短体；ZCCHC3 及不同截短体质粒均不抑制长末端重复序列启动子活性；ZCCHC3 显著抑制 HIV-1 不同类型的 mRNA 的表达；ZCCHC3 的 C 端结构域结合 HIV-1 的 RNA。
结论 ZCCHC3 是一种可以抑制 HIV-1 病毒活性的新型宿主限制因子，抗 HIV-1 功能不受 cGAS 与 RIG-I 相关天然免疫通路的影响。ZCCHC3 可以通过降低病毒的 mRNA 的水平抑制病毒的复制，且没有选择性。抗病毒作用的结构域位于 ZCCHC3 蛋白的 N 端，且截短体的抗病毒活性仍较高。
目的 探讨噬菌体 vB_EcoP_06 在治疗多重耐药大肠埃希菌引起的尿路感染中的潜力，并为未来的研究方向提供数据支持。
方法 通过双层琼脂平板法从医院未经处理污水中分离出多重耐药大肠埃希菌噬菌体 vB_EcoP_06，并进行生物学特性测定。具体方法包括测定噬菌体的潜伏期、爆发量、温度稳定性和 pH 稳定性。此外，利用二代测序技术进行噬菌体基因组的全基因组分析和注释，探讨其基因组结构、遗传特性以及与其他噬菌体的亲缘关系。
结果 生物学特性测试表明，噬菌体 vB_EcoP_06 具有较短的潜伏期（20 min）和较大的爆发量（104 PFU/mL），显示其具备较强的感染力。该噬菌体在 –80 ~60 ℃的温度范围和 pH 值 4 ~ 12 的范围内能稳定生长。全基因组分析结果表明，vB_EcoP_06 的基因组为双链 DNA（dsDNA），全长 51 775 bp，GC 含量为 44%。该基因组包含 89 个开放阅读框，且未发现耐药基因和毒力基因。与其他噬菌体的比较分析表明，vB_EcoP_06 与 Escherichia phage haarsle、Shigella phage ESh4、Shigella phage pSf-1 具有较近的亲缘关系。
结论 噬菌体疗法在尿路感染中具有重要应用价值，优化噬菌体的生产和临床使用条件，可为抗生素耐药性的挑战提供有效的替代方案。
目的 探讨银杏黄素在体外对肝星状细胞（HSCs）的影响及机制。
方法 采用两种 HSCs 用于体外研究，分别为永生化人 LX-2 细胞与小鼠原代 HSCs。通过 CCK-8 实验、流式细胞术及 Western blot 评估银杏黄素在体外对 HSCs 活力、凋亡及纤维化活性的影响，进一步通过转录组测序（RNA-Seq）及小干扰 RNA（siRNA）探讨银杏黄素作用于 HSCs 的机制。
结果 银杏黄素（2.5 ~ 10 μmol/L）显著抑制两种 HSCs 的活力，诱导 HSCs 凋亡，并减少纤维化相关蛋白（COL1A1 与 αSMA）的表达，且呈剂量依赖性。通过对银杏黄素（0 vs 5 μmol/L）处理 48 h 后的 LX-2 细胞进行 RNA-Seq 发现，银杏黄素显著上调干扰素 γ（IFN-γ）通路及相关基因表达。Western blot 进一步证实，经银杏黄素处理后，LX-2 细胞内 IFN-γ 通路下游的 STAT1 磷酸化及干扰素调节因子（IRFs，包括 IRF1 和 IRF8）的表达增加。但在 siRNA 抑制 LX-2 细胞内 STAT1 表达后，银杏黄素的促凋亡及抗纤维化效应消失。
结论 银杏黄素在体外对 HSCs 呈显著的抗纤维化活性，其机制与激活 STAT1 信号并诱导 HSCs 凋亡有关。
目的 开发一种无动物源成分且低浓度二甲基亚砜的人脐带间充质干细胞自配冷冻保存液，研究其安全性及稳定性等特性。
方法 经过前期预实验配比一种无动物源成分且低浓度二甲基亚砜的自配冷冻保存液配方。用 3 份不同个体来源的人脐带间充质干细胞，分别采用传统程序降温（程序降温盒法和程序降温仪法）的冷冻保存液、两种非程序降温冷冻保存液（Stem-Cell Banker、自配冷冻保存液）降温后置于 –150 ℃ 以下的气相液氮罐储存。24 h 后对细胞进行复苏，通过对细胞进行安全性（细菌及真菌检测、支原体及细菌内毒素、核型分析、异常毒性检测），有效性（分化潜能、免疫调节功能分析）及其细胞特性（细胞形态、活率、细胞表面标志物检测）考察分析其冻存质量。
结果 细胞活率、无菌检测和支原体及异常毒性检测均符合标准，无异常。流式检测各组细胞表面标志物 CD73+、CD90+、CD105+ 表达无显著性变化；CD34-、CD45- 低表达，均无显著性变化；成骨、成脂、成软骨的分化潜能不受降温方式的影响；G 显带技术确认各组染色体核型为正常人体二倍体核型；对 Th1/2/17细胞增殖有抑制作用，对 Treg 细胞增殖具有促进作用。
结论 自配冷冻保存液具有配方明确、可批量配制、批次间差异小、安全性好、设备适用性广泛、人员操作更加便捷与稳定可靠等优点，具有临床使用的潜能。
透皮吸收研究作为纳米材料安全性评估中的关键一环，其首要前提在于选择适宜的实验模型来模拟供试品在人体皮肤中的透皮行为。本文对透皮吸收研究中常见的体内模型、离体皮肤模型、人工 3D 皮肤模型、人工膜模型和皮肤损伤模型等进行梳理，对其基本结构、实验原理、最新研究进展以及在纳米材料透皮吸收研究中的实际应用情况进行总结，分析各种实验模型在实际应用中的优劣，为建立行业统一的技术标准奠定基础。
目的 对 2014 年发布的 YY/T 1233—2014《心肌肌钙蛋白-I 定量测定试剂（盒）（化学发光免疫分析法）》进行修订并验证。
方法 选择不同方法学的普通和高敏心肌肌钙蛋白（cTnI、cTnT）测定试剂盒，按照修订的行业标准进行验证。
结果 共有 57 个试剂盒参与了验证，其中 42 个（74%）产品验证指标均符合标准要求，有 15 个（26%）产品在准确度、检出限、线性、重复性等性能指标的评价中有 1 个（21%）或 2 个（5%）指标不符合标准要求。
结论 《心肌肌钙蛋白测定试剂盒（标记免疫分析法）》行业标准的修订及时、科学、合理，适用范围更加全面，有助于规范心肌肌钙蛋白试剂盒的技术要求和检验方法，提高产品质量，并为其上市前后的监管提供技术依据。
