中国医药生物技术

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卷首语

新春寄语

盛丰年

2012, 7(1): 1-1. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.001

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述评

中国干细胞产业发展概况分析

钟华, 安新颖, 单连慧, 李海存, 黄家学, 池慧

2012, 7(1): 2-4. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.002

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论著

红树林植物内生放线菌I07A-01824发酵液中杀线虫活性成分的分离、纯化与鉴定

陶玲, 旭格拉?哈布丁, 韩宁宁, 余生艳, 闫蕾蕾, 栾迎春, 刘少伟, 郭琳, 蒋忠科, 余利岩, 孙承航

2012, 7(1): 5-8. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.003

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目的建立稳定有效的体外杀线虫模型，并从红树林植物木榄内生放线菌 I07A-01824 的发酵液中分离纯化具有杀线虫活性的物质，并鉴定其化学结构。方法在体外杀线虫模型指导下，利用硅胶层析、高效液相色谱等方法对放线菌 I07A-01824 的发酵液进行分离纯化，得到高纯度的杀线虫活性物质；通过现代波谱分析技术对其进行结构解析，确定其化学结构。结果红树林内生放线菌 I07A-01824 的次级代谢产物中具有较强杀线虫活性的物质，为一不饱和脂肪酸，化学结构为 5,8-二烯十四酸；27.3 mg/L 剂量下开始显示对秀丽隐杆线虫有活性，其 24 h 后的 LC₅₀ 值为 162.8 mg/L。结论此不饱和脂肪酸对线虫有较强的致死作用，并且在内生放线菌 I07A-01824 菌株的次级代谢产物中稳定存在。

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论著

蒙药材瑞香狼毒体外细胞毒性的研究

王玉华, 杨夏, 孙丽君, 杨丽敏

2012, 7(1): 9-13. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.004

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目的研究蒙药瑞香狼毒炮制前后的体外细胞毒性和抗肿瘤活性。方法利用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇分别萃取获得瑞香狼毒药材生品、奶制品、煎膏制品的各溶剂提取物，再通过萃取、分离纯化方法分别获得瑞香狼毒的9 个单体化合物、总蛋白质和6 个相对分子质量不同的蛋白质组分（Pr.1 ~ Pr.6）。将各溶剂提取物及单体化合物制成浓度为2.0 mg/ml的溶液，总蛋白质制成浓度分别为 0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 mg/ml 的系列溶液，各蛋白质组分制备成浓度均为10 mg/ml 的溶液，分别作为样品溶液，采用MTT 法分别测定各样品对人肝癌 SMMC-7721 细胞、狗肾 MDCK 细胞的生长抑制作用。结果瑞香狼毒总蛋白质抗肿瘤活性和细胞毒性作用随其浓度增加而增强，其中4 个蛋白质组分呈现较强的抗肿瘤活性，其活性由强至弱依次为Pr.4 ≥Pr.6 ≥Pr.3 = Pr.2，3 个蛋白质组分具有细胞毒性，其毒性由强至弱依次为Pr.4 ≥ Pr.3 ≥ Pr.1。瑞香狼毒单体化合物中，西瑞香素、狼毒色原酮、异狼毒素呈现不同程度的抗肿瘤活性，而狼毒色原酮、异狼毒素同时具有较弱的细胞毒性。除石油醚和多糖提取物外，瑞香狼毒药材生品各溶剂提取物均呈现不同程度的抗肿瘤活性和细胞毒性，并呈药物剂量依赖性；而炮制后，在保留一定程度抗肿瘤活性的基础上，其相应各溶剂提取物的细胞毒性均降低。结论瑞香狼毒的细胞毒性主要源自多成分的协同作用，其蛋白质可能是瑞香狼毒的主要毒性位点之一，而炮制方法可降低瑞香狼毒药材的毒性且保留其生物活性。

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论著

罗布泊来源胀果甘草根际枯草芽孢杆菌GA21次生代谢产物结构与活性初步研究

靳婧, 旭格拉?哈布丁, 刘少伟, 郭琳, 蒋忠科, 栾迎春, 李展先, 潘臻, 孙承航

2012, 7(1): 14-19. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.005

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目的分离鉴定枯草芽孢杆菌 GA21 发酵液中次生代谢产物并对其活性进行初步研究。方法采用 TLC、HPLC 等分离手段对次生代谢产物进行分离；通过 HR-ESI 质谱、1D-NMR 和 2D-NMR对其结构进行鉴定；以琼脂平板法检测其次生代谢产物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、稻瘟菌、白色念珠菌的拮抗活性。结果分离得到两个异香豆素类次生代谢产物：GA21-20 和 GA21-26；其中 GA21-20 的化学结构与Amicoumacin B 一致，但无抗细菌及真菌活性；GA21-26 有抗真菌活性，但无抗细菌活性，分子量为 435.20890，分子式为 C₂₁H₂₉O₇N₃，是一新的 3, 4-二氢异香豆素类抗生素。GA21-26 在2.5 μg/纸片对白色念珠菌即可显示抑制活性，在80 μg/纸片对水稻稻瘟菌显示抑制活性，表明 GA21-26 在拮抗医学条件致病真菌方面有潜在用途。结论枯草芽孢杆菌 GA21 能产生一系列 3, 4-二氢异香豆素类抗生素，其次级代谢产物值得进一步研究。

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论著

携带miR29c重组腺病毒的制备及其促骨髓瘤细胞凋亡作用

张怡堃, 王华, 杨萍, 李泽良, 杨月峰, 陈协群, 王立生

2012, 7(1): 20-25. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.006

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目的制备携带 miR29c 的重组腺病毒 Ad5F11p-miR29c，评价 miR29c 对骨髓瘤细胞凋亡的影响。方法巢式 PCR 扩增得到 hsa-miR29c，将 hsa-miR29c 基因克隆到腺病毒穿梭质粒 pShuttle-CMV，得到 pShuttle- CMV-miR29c。鉴定正确后，PmeI 线性化并转化含 Ad5F11p 骨架质粒的 BJ5183 感受态细胞，重组获得腺病毒载体。PacI 线性化的重组腺病毒质粒转染 HEK293 细胞，制备重组腺病毒 Ad5F11p-miR29c。以对照病毒 Ad5F11p-EGFP 感染人骨髓瘤细胞系 SKO-007、U266 和 XG7，通过流式细胞术确定最佳感染复数。Ad5F11p-miR29c 以最佳感染复数感染骨髓瘤细胞，流式细胞术检测 miR29c 对细胞凋亡的影响。结果 PCR 扩增获得 miR29c 基因，成功将其连接到腺病毒穿梭质粒 pShuttle-CMV，经测序鉴定正确。采用 Ad-easy 系统，成功构建并制备了 CMV 启动的重组腺病毒 Ad5F11p-miR29c。流式细胞术结果显示，Ad5F11p-EGFP 对 SKO-007 和 U266 细胞的最佳感染复数为 150 MOI；而 XG7 为 100 MOI。Ad5F11p-miR29c 以最佳感染复数感染细胞 48 h 后，细胞凋亡率升高。SKO-007 细胞的凋亡率达到 26.5%，XG7 细胞的凋亡率达到 46.9%。结论成功制备重组腺病毒 Ad5F11p-miR29c，并证实 miR29c 能够诱导骨髓瘤细胞凋亡。

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论著

Dectin-1介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12的研究

陈青, 陈晓, 孙俊, 曾容, 胡素泉, 李岷, 刘维达

2012, 7(1): 26-29. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.007

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目的探讨香菇多糖能否依赖 Dectin-1 介导而诱导人单核细胞系 THP-1 细胞产生 IL-12。方法香菇多糖作用 THP-1 细胞后，实时荧光定量 RT-PCR 检测 Dectin-1、IL-12p35 和 IL-12p40 的 mRNA 表达水平；ELISA 法检测 THP-1 细胞分泌 IL-12 的含量；以Dectin-1 抑制剂昆布多糖预处理 THP-1 细胞，比较香菇多糖诱导产生 IL-12 的变化。结果香菇多糖可上调 THP-1 细胞表达 Dectin-1 的 mRNA 水平；能上调 THP-1 细胞 IL-12p35 和 IL-12p40 的 mRNA 表达和 IL-12 分泌；昆布多糖可明显抑制香菇多糖诱导 THP-1 细胞分泌 IL-12。结论 Dectin-1 能介导香菇多糖诱导人单核细胞系 THP-1 细胞产生IL-12。

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论著

医用自交联透明质酸钠凝胶预防兔硬膜外粘连的安全性研究

梁文锴, 郭全义, 韩树峰, 张莉, 彭江, 刘舒云, 梁增义, 许文静, 卢世璧

2012, 7(1): 30-36. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.008

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目的利用体感诱发电位及运动功能评分，评价医用自交联透明质酸钠凝胶预防椎板切除术后硬膜外粘连的安全性。方法将 L5 全椎板切除的新西兰兔 24 只随机分为 4 组，A 组为对照组：术区生理盐水冲洗后关闭切口；B 组、C 组、D 组均为实验组：均在术区硬脊膜暴露区覆盖医用自交联透明质酸钠凝胶，而覆盖剂量各不相同，分别为 0.5、0.75和1.0 ml。分别于麻醉后，椎板切除术后，闭合手术切口之后，术后 8 周这 4 个时间点进行体感诱发电位监测并记录潜伏期值。并分别于术前，术后 1 d，术后 8 周对各组动物进行后肢运动功能评分。结果麻醉后和椎板切除术后各组潜伏期值无统计学差异（P > 0.05）。在关闭切口后测定各组的潜伏期值显示：A 组和 B 组潜伏期值均无延迟（P > 0.05），C 组和 D 组潜伏期值出现明显延迟（P < 0.05）。在术后 8 周复测各组潜伏期值，均处于正常范围（P > 0.05）。运动功能评分结果：术前所有动物评分均正常。在术后 1 d，A 组和 B 组动物的评分仍然正常，C 组和 D 组的动物评分下降。在术后 8 周，各组动物的运动功能评分均再次正常。结论体感诱发电位是测定脊髓损伤的敏感指标；椎板切除术后局部覆盖预防粘连剂有剂量的要求，0.5 ml 的医用自交联透明质酸钠凝胶不会对该动物模型的脊髓的电生理功能及后肢运动功能产生影响。

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论著

Snail在乳腺癌中的表达及其与上皮-间质转化的关系

刘志容, 吴诚义

2012, 7(1): 37-42. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.009

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目的研究 Snail 蛋白在乳腺癌组织中的表达，并探讨 Snail 蛋白及其调控的上皮-间质转化（EMT）与乳腺癌恶性生物学行为的相关性。方法采用免疫组织化学 SP 法检测 20 例正常乳腺组织、60 例乳腺癌组织（非特殊性浸润性导管癌）及其中 20 例乳腺癌癌旁组织中 Snail 蛋白、上皮标记物 E-cadherin 蛋白、间质标记物 Vimentin 蛋白的表达；分析乳腺癌组织中 3 种蛋白表达强度的相关性，以及 Snail 蛋白表达与乳腺癌淋巴结转移的关系。结果 ①在正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织、乳腺癌组织中，Snail 蛋白表达逐渐递增，其阳性率分别为 0、30%、53.3%；Vimentin 蛋白表达亦逐渐递增，其阳性率分别为 0、40%、63.3%；E-cadherin 蛋白表达则逐渐减少，其阳性率分别为 100%、75%、56.7%；正常乳腺组织、乳腺癌癌旁组织与乳腺癌组织间 3 种蛋白的表达差异均具有统计学意义（均 P < 0.05）。② Snail 蛋白表达与 Vimentin 蛋白表达呈显著正相关（r = 0.536、P = 0.000）；Snail 蛋白表达与 E-cadherin 蛋白表达呈负相关（r = –0.413、P = 0.001）；3 种组织中，E-cadherin和Vimentin蛋白两者的表达差异呈显著负相关（r = –0.526、P = 0.000）。③Snail 蛋白的表达与乳腺癌腋窝淋巴结转移呈正相关，差异有统计学意义（r = 0.600、P = 0.000）。结论锌指转录因子 Snail 可能通过参与调控 EMT 过程从而在乳腺癌的发生和侵袭过程中发挥重要作用，并推动乳腺癌的远处淋巴结转移。

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综述

琼脂糖凝胶中DNA检测方法的研究进展

尤伟静, 陈茂, 马卫德, 丛维涛, 金利泰

2012, 7(1): 43-46. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.010

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综述

新型雌激素受体ER-α36的生物学效应及其相关疾病的研究现状

彭瑶, 连增林

2012, 7(1): 47-50. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.011

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综述

热休克蛋白-肽复合物与肿瘤免疫

牛保华, 齐义军, 晁玮霞, 马远方

2012, 7(1): 51-53. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.012

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综述

内脏高敏感发生机制的研究进展

董明, 郭欣欣, 吴焕淦, 赵天平, 刘慧荣

2012, 7(1): 54-58. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.013

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综述

合成生物学研究进展

艾瑞婷, 于振行

2012, 7(1): 59-61. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.014

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综述

树突状细胞疫苗的现状与未来

邵惠训

2012, 7(1): 62-65. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.015

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技术与方法

冷冻干燥法保藏放线菌菌株32 ~ 39年存活性试验

苏静, 王桂兰, 赵仪英, 余利岩, 刘红宇

2012, 7(1): 66-68. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.016

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调查与研究

米非司酮治疗子宫肌瘤有效性的Meta分析

王玉晶, 单永强, 陈大方

2012, 7(1): 69-73. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.017

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讲座

如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料 XV. 用 SAS 软件实现具有一个重复测量的两因素和具有两个重复测量的两因素设计定量资料的统计分析

王琪, 胡良平, 高辉

2012, 7(1): 74-77. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2012.01.018

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