中国医药生物技术

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述评

基因工程药物开发热点－－成纤维细胞生长因子家族

李校堃肖倩韩静肖健

2010, 5(5): 1-325-334. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.001

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成纤维细胞生长因子（f1ibroblast growth factor，FGF）是一类具有广泛生物学活性的肽类物质，是多能信号分子，具有参与细胞增殖、分化和游走等功能。FGF 具有很强的促细胞生长作用和广泛的生物学作用，能影响多种细胞的生长、分化及功能，如血管内皮细胞、平滑肌细胞、心肌细胞、成纤维细胞、神经元、星形胶质细胞、卵泡粒层细胞等。FGF 在人发育的各个时期大量表达，在体内和体外均具有活性，参与血管新生、促有丝分裂、细胞分化、细胞迁移、组织创伤修复等。FGF 同时也是重要的有丝分裂促进因子，是形态发生和分化的诱导因子，在正常生理和病理过程中参与生长发育和组织损伤的修复过程。大部分 FGF 通过结合细胞表面的磷酸激酶 FGF 受体发挥生物学功能，FGF 可以与肝素和硫酸肝素糖蛋白（HSPG）结合，这种结合能增强 FGF 和受体的结合作用。最近人们也发现 FGF19、FGF21 和 FGF23 亚家族具有调节内分泌激素的功能，如对胆汁酸、胆固醇、葡萄糖、维生素 D 和磷酸盐起到内稳调节器的作用，这种作用的发生主要依赖于靶向组织中 klotho 蛋白质的存在。......

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述评

肿瘤的分子靶向治疗

胡政, 周桂生, 周光飚

2010, 5(5): 2-335-341. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.002

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癌症是威胁人类健康的重大疾病，发病率及死亡率居高不下；总死亡人数更是呈逐年上升的趋势，已成为人类健康的最大杀手。在我国，恶性肿瘤因其难于早期发现、诊断和治疗已经成为严重危害人们生活幸福和影响居民健康指数的最重要因素之一。目前癌症的主要治疗手段仍是手术、化疗和放疗，总体治疗效果不尽如人意，尤其对处于中晚期的癌症，因失去最佳手术时机往往要依赖大剂量化疗来延长患者的生存期；与此同时，化疗药物显著的毒副作用也使得患者及家属备受痛苦。近年来，一种新型疗法——肿瘤分子靶向治疗因其具有疗效高、副作用低的特点而备受瞩目：即利用特异性分子（单克隆抗体、小分子化合物等）封闭或抑制相关分子靶点，从而抑制肿瘤细胞的生长、转移或诱导其凋亡。因此各种新型分子靶向治疗药物成为近年来肿瘤研究的热点，也逐步成为临床肿瘤治疗的重要组成部分^[1]。

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论著

用安德森空气生物采样器采集病毒气溶胶的研究

陈岚, 车红, 任丽丽, 王健伟

2010, 5(5): 3-342-347. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.003

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目的以表达绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的重组腺病毒（rAdvGFP）为模式病毒，进行气溶胶的主动发生实验和模拟剧烈吹打、振荡混匀等操作，利用安德森采样器进行气溶胶的采集，以建立简单易行的病毒气溶胶采集检测体系。方法用气溶胶发生器模拟模式病毒的气溶胶主动发生，分别在距离发生器管口 0、10 和 20 cm 处放置采样器及培养皿，在气溶胶发生 30 s 时开始采集，共采集 5 min。在模拟吹打操作中，将 10 ml 病毒液置于 50 ml 离心管中，用微量移液器反复吸取吹打病毒液；在模拟振荡操作中，将 10 ml 病毒液置于 50 ml 离心管中盖紧，以振荡器最大速度涡旋振荡 1 min，立即打开管盖采集 2 min，然后盖紧再重复振荡 30 s 后开盖继续采集。两种模拟操作均在距离管口 0 和 10 cm 处放置采样器及培养皿，各采集 5 min。收集各采样器及培养皿中的液体，利用阳离子聚合物聚凝胺浓缩后用 PCR 方法检测病毒核酸，并接种人胚肾 293 细胞进行病毒的培养，在荧光显微镜下观察 GFP 蛋白的表达。结果模拟气溶胶主动发生时，将置于距发生器管口 0、10 和 20 cm 的采样器和培养皿中的采集液接种细胞均可观察到绿色荧光，并可检测到病毒核酸。模拟剧烈吹打时，置于 0 cm 处的培养皿内可检测到病毒，而置于 0 cm、10 cm 处采样器和 10 cm 处培养皿中均未检测到病毒。在剧烈振荡模拟试验中，在距离管口 0 cm 的采样器和培养皿中均可检测到病毒，在置于 10 cm 处的采样器中未检测到病毒，在置于 10 cm 处的培养皿中可检测到病毒。结论利用 rAdvGFP 模式病毒和安德森采样器初步建立了病毒学实验气溶胶收集检测体系，对模拟危险操作感染性材料所产生的气溶胶做出危险评估，为制定病毒学实验操作规范提供了依据

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论著

下颌骨节段性缺损修复组织工程中珊瑚支架残留率的研究

袁捷, 刘广鹏, 韦敏, 祁佐良, 崔磊, 曹谊林

2010, 5(5): 4-348-352. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.004

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目的探讨骨髓基质干细胞（bone marrow stromal cell，BMSC）复合珊瑚修复犬下颌骨节段性缺损支架的残留率。方法体外扩增、成骨诱导培养犬 BMSC，分别将第二代细胞复合珊瑚后植入犬自体右侧 3 cm 的下颌骨节段性缺损，术后 12 周（n = 6），32 周（n = 6）取材后分别通过 Micro-CT 检测和大体、组织学图像分析骨修复、支架残留率和生物力学修复强度。结果 Micro-CT 检测和组织学图像分析均表明，BMSC-珊瑚组组织工程骨 12 周时支架残留率显著高于 32 周（P < 0.05），而新骨随材料降解逐步成熟；生物力学显示术后 32 周力学强度显著高于 12 周（P < 0.05）。结论自体成骨诱导 BMSC 复合珊瑚形成的组织工程骨可良好修复犬下颌骨节段性缺损，随时间延长材料逐步降解，组织工程下颌骨进一步成熟。

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论著

β雌激素受体沉寂表达载体的构建及表达

孙旭妍陶敏芳程蔚蔚王玉东

2010, 5(5): 5-353-356. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.005

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目的构建雌激素受体 β（ERβ）亚型沉寂表达载体，并观察其转染成骨细胞后抑制 ERβ 基因表达的效果。方法参考人 ERβ 基因 mRNA 序列，设计、合成 ERβ-shRNA 的 DNA Oligo 后行 PCR 扩增，获得的 shRNA 双链 DNA 片段与 pLVTHM-GFP 质粒双酶切后连接，转化大肠杆菌 E. coli DH5α 感受态细胞。取鉴定正确的 pLVTHM-GFP/ERβ-shRNA 重组质粒转染人成骨 hMG63 细胞，实验分空白载体组、空白对照组和 ERβ-siRNA 组，转染 48 h 后于倒置荧光显微镜下观察各组细胞的转染效果，并采用流式细胞术检测转染效率。抽提各组细胞的总 RNA，经 RT-PCR 生成 cDNA，Realtime- PCR 检测 ERβ 基因的抑制效率。结果倒置荧光显微镜下观察显示，ERβ-siRNA 组 hMG63 细胞 90% 以上呈现绿色荧光。流式细胞术检测 ERβ-shRNA 转染 hMG63 细胞的转染效率为 92.3%。Realtime-PCR 检测结果表明，ERβ-siRNA 组 ERβ 表达量（0.17 ± 0.01）仅约为空白载体组（1.00 ± 0.01）的 17.3%（P < 0.001），ERβ-siRNA 对 hMG63 细胞 ERβ 基因的抑制效率约为 83%。结论成功建立了人 ERβ 沉寂表达的成骨细胞模型，慢病毒载体介导的 ERβ-siRNA 能有效抑制成骨细胞 ERβ 基因的表达，满足了研究成骨细胞中 ERβ 相关功能的需要。

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论著

IL-27对哮喘小鼠气道炎症的影响

赵云峰梁栋张梅吴学玲

2010, 5(5): 6-357-360. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.006

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目的研究 IL-27 对卵白蛋白（OVA）激发哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 24 只雌性 BALB/c 小鼠随机分为生理盐水组、哮喘组及 IL-27 组，每组 8 只。应用 OVA 建立哮喘模型，IL-27 组小鼠应用 1 μg IL-27（溶于 50 μl PBS 中）滴鼻给药，观察 3 组小鼠肺组织病理改变，计数支气管肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞；ELISA 法测定小鼠 BALF 中 IL-4 和 IFN-γ 浓度，RT-PCR 测定肺组织 T-bet mRNA 的表达量。结果 IL-27 组小鼠肺组织炎症反应明显轻于哮喘组小鼠；IL-27 组小鼠 BALF 中嗜酸性粒细胞计数为（2.21 ± 0.33）× 107/L 明显低于哮喘组的（12.82 ± 2.17）× 107/L（P < 0.01）；IL-27 组小鼠 BALF 中 IL-4 浓度为（20.4 ± 3.2）μg/L，明显低于哮喘组的（61.3 ± 13.1）μg/L（P < 0.05）；IL-27 组小鼠 BALF 中 IFN-γ 浓度为（50.3 ± 6.3）μg/L，明显高于哮喘组的（11.1 ± 3.3）μg/L（P < 0.05）；IL-27 组小鼠肺组织 T-bet mRNA 表达量（吸光度积分比值）为（0.268 ± 0.048），明显高于哮喘组的（0.130 ± 0.012）（P < 0.05）。结论 IL-27 可能通过增强 T-bet mRNA 的表达增强 Th1反应，减少 BALF 中嗜酸性粒细胞数量，进而减轻了哮喘小鼠肺组织炎症反应。

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论著

卡斯帕酶-3 抑制剂的高通量筛选及活性化合物F03ZA-575 的初步研究

李韶菁任晓董悦生张华郑智慧路新华段海清

2010, 5(5): 7-361-366. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.007

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目的筛选并初步研究微生物来源的卡斯帕酶-3（Caspases-3）抑制剂活性化合物。方法使用 E.coli 异源表达的卡斯帕酶-3 作为靶酶，建立基于 Caspase-3 酶抑制剂的体外高通量筛选模型并对微生物来源的共计 10 026 个次级代谢产物提取物进行了筛选。使用有机溶剂萃取、硅胶柱和 LH-20 柱层析、高压液相分离等方法从代谢产物中分离活性化合物并经各种理化性质及 NMR 分析等对活性化合物的结构进行确定。结果从 10 026 个微生物来源的代谢产物中筛选获得了10 个阳性样品。其中，从 1 株真菌的代谢产物中分离得到的化合物 F03ZA-575 对 Caspase-3 酶显示出较强的抑制活性，结构解析确认该化合物与 Duclauxin 同质。结论该化合物对 Caspase-3 酶的抑制活性将有助于揭示其抗肿瘤作用的机制。

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论著

杂交瘤研究中染色体分析的方法及其意义

林克勤易文褚嘉祐

2010, 5(5): 8-367-370. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.008

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目的探讨细胞同步化染色体高分辨技术检测杂交瘤细胞染色体的可行性。方法选择小鼠骨髓瘤 SP-2/O 细胞株、人淋巴母细胞 CKM-8 细胞株、人骨髓瘤 KM 细胞株、抗小鼠胰腺癌鼠-鼠杂交瘤细胞株，体外培养 24 ~ 48 h。对 4 种细胞株分别进行同步化处理，加入 5-氟脱氧尿嘧啶核苷和尿嘧啶培养 16 ~ 18 h 后，加入 5-溴脱氧尿嘧啶核苷，并在收集细胞前加入秋水酰胺；收集细胞进行离心、低渗处理、固定、再固定，制备染色体滴片，应用胰蛋白酶-Giemsa 染液对染色体进行 G 显带处理。每例标本以 30 个以上分裂象做众数分析，按照《人类细胞遗传学国际命名体制》（ISCN 1978）对细胞株染色体进行 G 显带分析。结果 4 种细胞株的染色体均较长、分散良好、形态较好。SP-2/O 细胞株、CKM-8 细胞株、KM 细胞株、抗小鼠胰腺癌鼠-鼠杂交瘤细胞株的染色体数目分别为 63、46、42、105，其中抗小鼠胰腺癌鼠-鼠杂交瘤细胞染色体数目接近小鼠淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞染色体数的总和，且多数为端着丝点染色体。结论细胞同步化染色体高分辨技术检测杂交瘤细胞染色体具有良好的效果。

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综述

肿瘤干细胞靶向治疗研究进展

张金龙钱海利林晨李贵新

2010, 5(5): 9-371-373. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.009

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肿瘤干细胞（cancer stem cell，CSC）是存在于肿瘤组织中的一小部分具有干细胞性质的细胞群体，它具有自我更新的能力，是形成不同分化程度肿瘤细胞和肿瘤不断扩大的源泉。现有治疗肿瘤的方法主要是针对肿瘤组织内的大多数细胞，而不是肿瘤干细胞。即使 99.99% 的肿瘤细胞被杀死，但只要有 0.01% 的肿瘤干细胞存在，仍然会造成肿瘤的复发和转移。因此，肿瘤生物学研究的最新观点认为治愈肿瘤的关键在于杀灭肿瘤干细胞，也由此掀起了针对肿瘤干细胞靶向治疗的热潮。随着研究的深入，肿瘤干细胞靶向治疗的观点越来越被人们所接受，其特性及作用机制也逐渐被人们所认识，进而研发出许多针对肿瘤干细胞的靶向治疗药物。因此，本文就目前肿瘤干细胞的靶向治疗作一综述。......

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综述

恶性肿瘤放射免疫治疗技术的研究进展

唐军

2010, 5(5): 10-374-376. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.010

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放射免疫治疗（radioimmunotherapy，RIT）是将针对肿瘤特异性抗原的单克隆抗体用核素标记后，对肿瘤细胞进行的靶向治疗，也叫“生物导弹”。肿瘤放射免疫疗始于19 世纪 50 年代，最初是用多克隆抗体进行，剑桥大学的 Kohler 和 Milstein 确立杂交瘤技术制备单克隆抗体后，单抗技术迅速发展，越来越多的单克隆抗体药物问世，也使放射免疫治疗技术得到革命性的进步。RIT 的作用优点是与肿瘤抗原结合的物质如单克隆抗体（McAb）特异性的与目标位置结合，偶联在抗体上的放射性核素为“弹头”（治疗剂），进行内放射治疗，使肿瘤局部放射剂量比其他正常组织剂量明显升高，达到对肿瘤特异性杀伤而对正常组织损伤小。本文就放射免疫治疗临床应用现状及进展进行综述。......

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综述

白色念珠菌毒力因子的蛋白质组学研究进展

王斌曾明王雪松袁静

2010, 5(5): 11-377-380. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.011

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白色念珠菌（Candida albicans）是人体皮肤黏膜的正常寄生菌，也是临床上重要的条件致病性真菌。它可引起皮肤、黏膜及内脏的念珠菌病，是免疫力低下宿主感染的重要致病真菌之一，可导致浅表或深部的白色念珠菌病。近年来，器官移植免疫抑制剂、广谱抗生素的使用、癌症放疗化疗的增多、各种生物装置的体内置入和导管的留置、广谱抗菌药物的滥用和艾滋病的流行等，使得免疫功能低下者不断增多，深部真菌感染作为一种并发病，感染率大幅上升，已成为这些疾病患者死亡的主要原因。同时由于白色念珠菌为真核生物，其生物化学代谢途径与人类宿主有很高的相似性，很多抗真菌药物都会有副作用或者只能抑制而不能真正杀死病原生物。因此，念珠菌病已经从轻微的感染成为现代生物医学中重要的临床问题。由于几种常用抗真菌药物（如两性霉素 B、唑类药物和一些新的细胞壁抑制药）的效能降低、副作用较重、抗真菌类耐药性的出现，以及缺乏准确和快速诊断方案[1-3]，使这种致命性条件致病菌的发病率在持续增长。因此，白色念珠菌的毒力问题一直广受关注。白色念珠菌既为正常菌又是条件致病菌，它能够逃逸机体的免疫系统、治疗药物等，在合适的条件下进入机体组织内引起疾病。因而白色念珠菌的致病性和毒力可能是由一组因子决定，而不是由单一的物质决定的。白色念珠菌的几种毒力表现为对环境变化的适应性（即表型转换和二态性）、对宿主细胞及组织的黏附性及分泌水解酶等[4-6]。对其毒力因子的研究已成为蛋白质组学的主要研究内容，试图揭示白色念珠菌由正常菌变为致病菌的机制，从而控制白色念珠菌感染、发现新的疫苗或能够有更好治疗作用的抗真菌药物的靶标。......

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综述

贯叶金丝桃抗菌作用研究综述

江君郭树仁赵君贤张燕尹志超刘平兰

2010, 5(5): 12-381-384. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.012

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贯叶金丝桃（Hypericum Perforatum L.）又名贯叶连翘，是藤黄科多年生草本植物，在欧美也称圣•约翰草（St•John's Wort），为一传统的药用植物，分布广泛，主要分布于亚洲、欧洲和北美，在我国主要分布于湖北、四川、贵州、甘肃、山西、江西、江苏、山东等地，作为药用植物已有两千多年的药用历史，在欧洲一些国家被用来治疗各种皮肤损伤、烧伤和神经痛等。我国传统中医认为贯叶金丝桃具有清心明目、调经活血、止血生肌和解毒消炎等功效，现代药理学研究表明贯叶金丝桃具有抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒、抗菌、神经保护、抗氧化、治疗创伤和镇痛等作用。贯叶金丝桃提取物的抗菌作用早在 1954 年即有报道，研究发现贯叶金丝桃提取物对革兰阳性菌有很强的杀菌和抑菌作用，对极少数革兰阴性菌菌株有较弱的抑菌作用，无杀菌作用，对部分真菌也有抗菌作用。一些其他的金丝桃属植物提取物也发现有明显的抗菌作用。......

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技术与方法

中草药灭菌新技术-淮山药（粉）挤压膨化灭菌

刘钟栋尹胜利张九魁

2010, 5(5): 13-385-386. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.013

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国际贸易中的植物药类，一般须通过灭菌加工。我国常用的中草药灭菌方法有 Co60 辐照灭菌[1]、高温高压灭菌[2]、蒸气灭菌[3]、微波灭菌[4]等，目前，未见有挤压膨化灭菌的研究报道。挤压膨化过程的温度可达（100 ~ 190）℃，压力高达4.5 MPa，在这样的环境下，蛋白质和水分子之间的距离将缩小，水分子可以渗透和填充到蛋白质内的氨基酸周围，当膨化瞬间减压时，水分子汽化，巨大的膨化压力破坏了蛋白质的空间结构，从而改变了蛋白质的性质，达到灭菌目的；同时，挤压使某些非水小分子穿透微生物的细胞膜而致其受损，甚至彻底破坏，同样达到了灭菌目的。挤压膨化过程中霉菌和酵母、大肠杆菌等微生物难以生存[5]，因此，通过挤压膨化灭菌是可行的，本研究旨在探讨挤压膨化灭菌的工艺指标。......

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质量管理

中药复方制剂质量控制的研究

杨胜张定堃苏柘僮杨明

2010, 5(5): 14-387-391. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.014

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中药是中医防病治病的最重要物质手段，中药复方制剂是中药的重要组成之一。所谓中药复方制剂就是在中医药理论指导下，按照“君臣佐使”的组方原则，选择适宜的药味与剂量配伍而成的一类制剂。中药复方是中医辨证论治思想的具体体现，代表了传统中医药学的精髓和主流，也是中药新药研究的重要源泉。近年来，为了保证复方制剂的安全性与有效性，中药复方制剂质量控制的方法与手段成为中药现代化的最重要研究课题之一。本文首先回顾了我国中药复方制剂质量标准的历史和现状，综述了中药复方制剂质量控制的研究思想及相关的技术方法，并对其进展进行评价。......

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讲座

如何用SAS软件正确分析生物医学科研资料 Ⅺ. 用SAS软件实现正交设计定量资料的统计分析

胡良平陶丽新毛玮柳伟伟

2010, 5(5): 15-392-397. https://doi.org/10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.05.015

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编者按: 生物统计学是生物学领域科学研究和实际工作中必不可少的工具，在分子生物学迅速发展的今天，生物统计学更显示出了它的重要性。实验设计与数据统计分析是现代生物学的基石，是生物学研究者检验假说、寻找模式、建立生物学理论的有利工具，也是生物学研究者探索微观和宏观生物世界的必备基础知识。对于每天甚至是每时每刻涌现的大量的、以天文数字计量的分子遗传数据，必须借助统计学知识加以分析处理，才能从中获得有意义的信息。“生物多样性数据分析”是开展生物多样性研究的一个重要方面，数据分析能力的高低极大地影响着我们对各种生态学现象认识的深度和广度。现在，电子计算机的普及使得生物统计分析过程大大简化，生物统计分析软件包的普及将生物统计学从统计学家的书本里解放了出来，简化了生物统计分析过程，使之成为生物学研究者的常用工具。本刊特邀军事医学科学院生物医学统计学咨询中心主任胡良平教授，以“如何用 SAS 软件正确分析生物医学科研资料”为题，撰写系列统计学讲座，希望该系列讲座能对生物医学科研工作者有所帮助。......

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协会之窗

中国医药生物技术协会再生医学专业委员会成立大会纪要

文勇

2010, 5(5): 16-398.

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2010 年 9 月 4 日，刚刚送走炎炎的夏季，凉爽的秋风迎来了中国医药生物技术协会再生医学专业委员会第一届全体委员大会暨成立大会的隆重召开。再生医学专业委员会是 2010 年 1 月 18 日由国家卫生部、民政部批准正式成立的（社证字第 3023-19 号），来至全国各地科研院所、院校、医院、企业的生物医学专家及企业管理者 60 多人出席了在北京友谊宾馆举行的成立大会。......

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协会之窗

第三届全国骨科修复与移植学术研讨会纪要

文勇

2010, 5(5): 17-398.

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2010 年 9 月 10 日 – 12 日，第三届全国骨科修复与移植学术研讨会在山西太原召开。本次会议由中国医药生物技术协会及下属骨组织库分会、中国工程院卫生学部、北京生物工程协会组织工程分会、中华骨科杂志、中国修复重建外科杂志、中国矫形外科杂志共同主办，由山西组织库承办。中国医药生物技术协会副理事长肖梓仁、中国工程院学部工程局谢冰玉副局长、中国红十字总会赈济救护部健康服务处候峰忠处长，中国辐射防护研究院院长常学奇、山西省食品药品监督管理局党组书记赵光国、中国医药生物技术协会骨组织库分会主任委员卢世璧院士以及著名骨科专家戴尅戎院士出席了开幕式。......

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协会之窗

中国医药生物技术协会骨组织库分会第二届全体委员会纪要

文勇

2010, 5(5): 18-399.

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中国医药生物技术协会骨组织库分会第二届全体委员会于 2010 年 9 月 12 日在太原召开，中国医药生物技术协会彭玉理事长，副理事长肖梓仁，第一届骨组织库分会主任委员卢世璧院士参加了会议，会议由中国医药生物技术协会副秘书长赵贵英主持。

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