目的 构建 MAGE-n159-167（QLVFGIEVV）表位肽与人热休克蛋白 70（HSP70）的融合基因并表达纯化。
方法 应用 PCR 方法，将 QLVFGIEVV 的 cDNA 序列融合到人 HSP70 基因的 3’ 端，将融合基因克隆入原核表达载体 pET-28a（+）中，构建重组质粒 pET-28a（+）QLVFGIEVV-HSP70；采用双酶切（Sac I、Hind III）及 PCR 鉴定后测序；转化大肠杆菌 E.coli BL21（DE3），用 IPTG 诱导表达，Ni Sepharose 6FF 亲和填料进行分离纯化，SDS-PAGE 检测表达及纯化结果。
结果 经 PCR 扩增成功获得约 2.0 kb 的目的片段，重组体经 Sac I、Hind III 双酶切分析及 PCR 结果与预期结果一致，测序正确。转入重组质粒的 E.coli BL21（DE3）经 IPTG 诱导、SDS-PAGE 分析得到 71 kD 左右的目的蛋白条带。用 Ni Sepharose 6FF 亲和填料分离纯化，获得了纯化的融合蛋白。
结论 成功构建原核表达载体 pET-28a（+）QLVFGIEVV- HSP70，并获得纯化的融合蛋白，为基于 MAGE-n 的肿瘤疫苗研制提供良好的抗原奠定了实验基础。
血管生成拟态（vasculogenic Mimicry，VM）是近年来提出的一个肿瘤微循环的全新概念。与经典的血管生成途径完全不同，VM 是高侵袭性肿瘤为了满足自身的血液供应，通过自身表型和细胞外基质重塑而围成的一种类血管样的管道，是不依赖血管内皮细胞的一种肿瘤微循环模式，VM 的发现解释了以抑制肿瘤血管生成为主要作用靶点的抗肿瘤治疗效果不佳的原因。自 1999 年 Maniotis 发现黑色素瘤组织中存在 VM 以来，人们开始认识到内皮细胞依赖的肿瘤血管生成并不是肿瘤唯一的微循环模式，在抑制肿瘤微循环的治疗中兼顾 VM 与血管生成，尤其重视 VM 的治疗才能获得良好疗效。尽管 VM 形成机制还尚未完全明确，但相关研究仍取得了很大进展，这对于寻找抑制 VM 的关键作用靶点，筛选有效的 VM 治疗药物，提高肿瘤疗效有着重要的现实意义。现将近年来 VM 形成机制的研究做一综述。......
